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大鼠肌酸激酶同工酶MM（CK-MM）ELISA試劑盒哪家好

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價(jià)格：電議

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采購度：634 原產(chǎn)地：美洲

發(fā)布時(shí)間：2018/6/26 17:16:01

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：大鼠肌酸激酶同工酶MM（CK-MM）ELISA試劑盒哪家好用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關(guān)液體樣本中大鼠肌酸激酶同工酶MM（CK-MM）的含量。

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標簽：大鼠肌酸激酶同工酶MM CK-MM廠(chǎng)家 ELISA試劑盒多少錢(qián)

詳細信息

大鼠肌酸激酶同工酶MM（CK-MM）elisa試劑盒哪家好

本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關(guān)液體樣本中大鼠肌酸激酶同工酶MM（CK-MM）的含量。
有效期：6個(gè)月
保存條件：2-8℃
本試劑盒僅供體外研究使用，不用于臨床診斷

實(shí)驗原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被大鼠肌酸激酶同工酶MM（CK-MM）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過(guò)溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠肌酸激酶同工酶MM（CK-MM）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長(cháng)下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

樣本處理及要求
1. 血清：全血標本請于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜后于1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
2. 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于2 - 8°C 1000g離心20分鐘，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
3. 組織勻漿：用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會(huì )影響測量結果），稱(chēng)重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應9mL的PBS，具體體積可根據實(shí)驗需要適當調整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復凍融。*后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。
4. 細胞培養物上清或其它生物標本：1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
注：標本溶血會(huì )影響*后檢測結果，因此溶血標本不宜進(jìn)行此項檢測。

標本處理
1. 本公司只對試劑盒本身負責，不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負責，請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量，預留充足的樣本。
2. 實(shí)驗前應預測標本含量，如果標本濃度過(guò)高，應對標本進(jìn)行稀釋?zhuān)瓜♂尯蟮臉吮痉显噭┖械臋z測范圍，計算時(shí)再乘以相應的稀釋倍數。標本使用0.01mol/L的PBS稀釋(PH=7.0-7.2)。
3. 若所檢樣本不包含在說(shuō)明書(shū)所列樣本之中，建議進(jìn)行預實(shí)驗驗證其有效性，并注意留存樣本。
4. 使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細胞提取液可能會(huì )由于某些化學(xué)物質(zhì)的引入導致ELISA實(shí)驗結果偏差。
5. 若樣本為細胞培養上清，因該類(lèi)樣本干擾因素較多，如：細胞狀態(tài)、細胞數量、采樣時(shí)間等，所以可能存在檢測不出的情況。
6. 某些天然蛋白或重組蛋白，包括原核及真核重組蛋白，可能因為與本產(chǎn)品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配，而不被檢測出。
7. 建議使用新鮮樣本，保存時(shí)間過(guò)長(cháng)可能會(huì )存在蛋白降解或變性導致實(shí)驗結果偏差。

需要而未提供的試劑和器材
1.酶標儀（450nm）
2.高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒溫箱
4.蒸餾水或去離子水

注意事項
1.嚴格按照規定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
2.洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過(guò)程中不要讓微孔干燥掉。
3.消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。
4.底物顯色液應呈無(wú)色或很淺的顏色，已經(jīng)變藍的底物液不能使用。
5.避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。
6.在儲存和溫育時(shí)避免強光直接照射。
7.平衡至室溫后再打開(kāi)密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8.任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會(huì )破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。
9.不能使用過(guò)期產(chǎn)品。
10.如果可能傳播疾病，所有的樣品都應管理好，按照規定的程序處理樣品和檢測裝置。

試劑準備
試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡后方可使用。
20×洗滌緩沖液的稀釋?zhuān)赫麴s水按1：20稀釋?zhuān)?份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

操作流程
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿(mǎn)洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長(cháng)處測定各孔的OD值。

實(shí)驗結果計算
以所測標準品的OD值為橫坐標，標準品的濃度值為縱坐標，在坐標紙上或用相關(guān)軟件繪制標準曲線(xiàn)，并得到直線(xiàn)回歸方程，將樣品的OD值代入方程，計算出樣品的濃度。

性能特點(diǎn)
1. 檢測范圍：5 ng/mL – 160 ng/mL。
2. 靈敏度：檢測濃度小于1.0 ng/mL。
3. 特異性：不與其它可溶性結構類(lèi)似物交叉反應。
4. 重復性：板內變異系數小于10% ，板間變異系數小于15% 。

說(shuō)明
1. 由于現有條件及科學(xué)技術(shù)水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進(jìn)行全面的鑒定與分析，本產(chǎn)品可能存在一定的質(zhì)量技術(shù)風(fēng)險。
2. *終的實(shí)驗結果與試劑的有效性、實(shí)驗者的相關(guān)操作以及當時(shí)的實(shí)驗環(huán)境密切相關(guān)，請務(wù)必準備充足的標本備份。
3. 不同批次的同一產(chǎn)品可能會(huì )有少許差別，如：檢測限、靈敏度以及顯色時(shí)間等，請依據試劑盒內說(shuō)明書(shū)進(jìn)行實(shí)驗操作，網(wǎng)站電子版說(shuō)明書(shū)僅作參考。
4. 只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測效果，不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴格遵守本試劑盒的實(shí)驗說(shuō)明才會(huì )得到*佳的檢測結果。

常見(jiàn)問(wèn)題
若實(shí)驗效果bu好，請及時(shí)對顯色結果拍照，保留所用板條及未使用試劑，并妥善保存，然后聯(lián)系我公司技術(shù)支持為您解決問(wèn)題。同時(shí)您也可以參考以下資料：
問(wèn)題可能原因解決方案
標準曲線(xiàn)差吸取及洗滌不充分充分的吸取及洗滌
移液不精確檢查和校正移液器
精密度低洗滌不充分按說(shuō)明書(shū)要求充分洗滌和浸泡
混勻不充分和吸取試劑不足充分混勻和吸取試劑
重復利用吸頭、容器和覆膜使用加樣器要更換新的吸頭、使用新的容器和覆膜
加樣不精確檢查和校正移液器
O.D值低每孔加的試劑量不精確校正移液器，精確加入試劑
溫育時(shí)間不正確保證充足的溫育時(shí)間
溫育溫度不正確試劑要平衡至室溫并保證準確的溫育溫度
酶標記物或底物失效通過(guò)混合酶標記物和底物，顏色應迅速顯現來(lái)檢查
沒(méi)有加入終止液按照說(shuō)明書(shū)實(shí)驗操作步驟加入終止液
超出讀數時(shí)間讀數在說(shuō)明書(shū)推薦的讀數時(shí)間內讀數
樣本值不正確的樣本儲存方式正確儲存樣本，使用新鮮樣本進(jìn)行實(shí)驗
不正確的樣本收集和處理方法采取正確的樣本收集和處理方法
待測物質(zhì)在樣本中含量低使用新鮮樣本，重復實(shí)驗

更新時(shí)間：2024/6/12 9:40:55

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