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恒遠生物|如何鑒定微生物

點(diǎn)擊次數:12221   發(fā)布時(shí)間:2023/8/30 15:21:17

    微生物是對藥品原料、生產(chǎn)環(huán)境和成品造成污染的重要因素,也是造成生產(chǎn)失敗、成品不合格、對人類(lèi)造成危害的重要因素。所以分離得到的污染微生物,進(jìn)行微生物鑒定,是十分必要的,也可為檢驗和生產(chǎn)提供有效的依據。

1、形態(tài)學(xué)特征
(1)細胞形態(tài)
    在顯微鏡下觀(guān)察細胞外形大小、形狀、排列等,細胞構造,革蘭氏染色反應,能否運動(dòng)、鞭毛著(zhù)生部位和數目,有無(wú)芽孢和莢膜、芽孢的大小和位置,放線(xiàn)菌和真菌的繁殖器官的形狀、構造,孢子的數目、形狀、大小、顏色和表面特征等。

(2)群體形態(tài)
通常是指以下情況的特征:
1)在一定的固體培養基上生長(cháng)的菌落特征:包括外形、大小、光澤、黏稠度、透明度、邊緣、隆起情況、正反面顏色、質(zhì)地、氣味、是否分泌水溶性色素等。
2)在一定的斜面培養基上生長(cháng)的菌苔特征:包括生長(cháng)程度、形狀、邊緣、隆起、顏色等;在半固體培養基上經(jīng)穿刺接種后的生長(cháng)情況。
3)在液體培養基中生長(cháng)情況:包括是否產(chǎn)生菌膜,均勻渾濁還是發(fā)生沉淀,有無(wú)氣泡,培養基的顏色等。如是酵母菌,還要注意是成醭狀、環(huán)狀還是島狀。

2、生理生化反應特征
(1)利用物質(zhì)的能力
包括對各種碳源利用的能力(能否以CO2為唯1碳源、各種糖類(lèi)的利用情況等)、對各種氮源的利用能力(能否固氮、硝酸鹽和銨鹽利用情況等)、能源的要求(光能還是化能、氧化無(wú)機物還是氧化有機物等)、對生長(cháng)因子的要求(是否需要生長(cháng)因子以及需要什么生長(cháng)因子等)。
(2)代謝產(chǎn)物的特殊性
這方面的鑒定項目非常多,如是否產(chǎn)生H2S、吲哚、CO2、醇、有機酸,能否還原硝酸鹽,能否使牛奶凝固、凍化等。
(3)與溫度和氧氣的關(guān)系
測出適合某種微生物生長(cháng)的溫度范圍以及它的適生長(cháng)溫度、zui低生長(cháng)溫度和zui高生長(cháng)溫度。對氧氣的關(guān)系,看它是否為好氧、微量好氧、兼性好氧、耐氧還是性厭氧。

3、生態(tài)學(xué)特征
    生態(tài)學(xué)特征主要包括它與其他生物之間的關(guān)系(是寄生還是共生,寄主范圍以及致病的情況)。在自然界的分布情況(pH情況、水分程度等)、滲透壓情況(是否耐高滲、是否有嗜鹽性等)。

4、血清學(xué)反應
    很多細菌有十分相似的外表結構或有作用相同的酶(如乳酸桿菌屬內各種細菌都有乳酸脫氫酶)。雖然它們的蛋白質(zhì)分子結構各異,但在普通技術(shù)下(如電子顯微鏡或生化反應),仍無(wú)法分辨它們。然而利用抗原與抗體的高度敏感特異性反應,就可用來(lái)鑒定相似的菌種,或對同種微生物分型。用已知菌種、型或菌株制成的抗血清,與待鑒定的對象是否發(fā)生特異性的血清學(xué)反應來(lái)鑒定未知菌種型或菌株。該法常用于腸道菌、噬菌體和病毒的分類(lèi)鑒定。利用此法,已將傷寒桿菌、肺炎鏈球菌等菌分成數十種菌型。

5、生活史
    生物的個(gè)體在一生的生長(cháng)繁殖過(guò)程中,經(jīng)過(guò)不同的發(fā)育階段。這種過(guò)程對特定的生物來(lái)講是重復循環(huán)的,常稱(chēng)為該種生物的生活周期或生活史。各種生物都有自己的生活史。在分類(lèi)鑒定中,生活史有時(shí)也是一項指標,如黏細菌就是以它的生活史作為分類(lèi)鑒定的依據。

6、對噬菌體的敏感性
    與血清學(xué)反應相似,各種噬菌體有其嚴格的宿主范圍。利用這一特性,可以用某一已知的特異性噬菌體鑒定其相應的宿主。

7、細胞壁組分分析
    細胞壁組分分析先應用于放線(xiàn)菌分類(lèi)中,把它作為區分“屬”的依據。近年來(lái),有人對18個(gè)屬的放線(xiàn)菌的細胞壁進(jìn)行了分析,根據細胞壁的氨基酸組成,將其分為6個(gè)細胞壁類(lèi)型,又根據細胞壁的糖的組成分成4個(gè)糖類(lèi)型,在此基礎上,結合形態(tài)特征提出了相應的科屬檢索表。

8、紅外光譜
    一般認為,每種物質(zhì)的化學(xué)結構都有特定的紅外光譜,若兩個(gè)樣品的吸收光譜wan全相同,可以初步認為它們是同一種物質(zhì)。因此,紅外光譜技術(shù)被應用到微生物的分類(lèi)中。它先后對芽孢桿菌、乳酸菌、大腸桿菌、酵母菌進(jìn)行分類(lèi),近年來(lái)又應用于放線(xiàn)菌分類(lèi)中。
    根據有關(guān)學(xué)者的試驗表明,這種方法簡(jiǎn)便快速,樣品少,結果較好,不僅可以初步了解各屬菌的細胞成分的化學(xué)性質(zhì),同時(shí)也有助于微生物間系統發(fā)育關(guān)系的探索。它也有不足之處,借助于紅外線(xiàn)光譜區分屬內的種和菌株是困難的,可以作為“屬”的分類(lèi)特征。

原創(chuàng )作者:上海恒遠生物科技有限公司

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